采血技能在臨床輔助診斷和監(jiān)測(cè)病情進(jìn)展等方面是一項(xiàng)非常關(guān)鍵的技術(shù)。采血不能簡(jiǎn)單的看成以靜脈穿刺和血液吸入注射器為開始和結(jié)束;血樣必須安全放置并保證完整,全程精心護(hù)理。
一、仔細(xì)計(jì)劃,選擇合適器材
采血需要準(zhǔn)備和計(jì)劃,包括采血量、采血部位、采血方法和采血順序,確保采血成功。對(duì)于脆弱和細(xì)小的靜脈,需要一個(gè)小規(guī)格的針頭;如果血管大小允許,大規(guī)格的針頭能為快速、大容量的采血提供最佳血流。采血體積也決定了注射器尺寸。
二、如何確定采血體積?
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物采血時(shí)應(yīng)注意不宜一次采血量過(guò)多或采血過(guò)于頻繁,否則因采血可影響動(dòng)物健康,造成貧血,甚至死亡。血液采集的可接受量和頻率取決于動(dòng)物的循環(huán)血液量。
一般采取以下原則進(jìn)行采血:
(1)單次采血量不超過(guò)循環(huán)血量的10%。
(2)如果實(shí)驗(yàn)需要多次采血,每周最大采血體積不超過(guò)循環(huán)血總體積的7.5%;每?jī)芍艿淖畲蟛裳w積不超過(guò)循環(huán)血總體積的15%。
(3)僅當(dāng)動(dòng)物已安-樂-死或者在終點(diǎn)期時(shí)進(jìn)行深度麻醉后才可以超過(guò)血液采集最大值。
三、選擇合適采血部位
由于不同的采血方法對(duì)動(dòng)物身體的損傷程度和操作方法不盡相同,盡量在滿足實(shí)驗(yàn)要求的基礎(chǔ)上選擇簡(jiǎn)單易行且對(duì)動(dòng)物傷害較小的采血方法。
(1)凡用血量較少的檢驗(yàn)如紅、白細(xì)胞計(jì)數(shù),血紅蛋白的測(cè)定,血液涂片以及酶活性微量分析法等,可刺破組織取毛細(xì)血管的血。
(2)當(dāng)需血量較多時(shí)可作靜脈采血。靜脈采血時(shí)若需反復(fù)多次,應(yīng)自遠(yuǎn)離心臟端開始,以免發(fā)生栓塞而影響整條靜脈。
(3)如研究毒物對(duì)肺功能的影響、血液酸堿平衡、水鹽代謝紊亂,需要比較動(dòng)、靜脈血氧分壓、二氧化碳分壓和血液pH以及K+、Na+、Cl-離子濃度,必須采取動(dòng)脈血液。
如果沒有特殊要求,大小鼠的終末采血都推薦安-樂-死或者深度麻醉后心臟采血,這種方式采血比較多,而且不容易污染。
對(duì)于小鼠,如果是非終點(diǎn)采血只有一兩次,眼眶采血比較適合,采血量比較多,操作也很容易,但是需要麻醉(詳細(xì)操作點(diǎn)擊:大鼠眼眶采血標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程);間斷多次采血,推薦頜下靜脈采血或隱靜脈采血,這兩種采血方法在操作前都不需要麻醉。而且對(duì)小鼠的傷害小,采血量與眼眶靜脈叢采血法相當(dāng),采血后恢復(fù)快。
對(duì)于大鼠非終點(diǎn)采血,無(wú)論單次采血還是多次采血都比較推薦使用注射器進(jìn)行頸靜脈采血,隨抓隨采。如果不從尾靜脈給藥的話,尾靜脈采血也是非常推薦的方式。
四、了解具體的采血要求
不同的采樣管需要特定檢測(cè)樣本,應(yīng)事先計(jì)劃合適抽血順序,以防止由于試管添加劑污染而產(chǎn)生錯(cuò)誤結(jié)果。采血時(shí)要注意:
(1)采血場(chǎng)所有充足的光線;室溫夏季最好保持在25~28℃,冬季以15~20℃為宜;
(2)采血用具與采用部位一般需要進(jìn)行消毒;
(3)采血用的注射器和試管必須保持清潔干燥;
(4)若需抗凝全血,在注射器或試管內(nèi)需預(yù)先加入抗凝劑。
采血看似簡(jiǎn)單,但我們必須周密計(jì)劃,注意細(xì)節(jié),準(zhǔn)確可靠,使動(dòng)物經(jīng)受最小的應(yīng)激和傷害。